Yargı Neva Kim

Abstract: The aim of this study is to determine the sentence information activities for the process of reading and listening/ monitoring texts in six themes in Turkish 8th Grade Lessons (Dörtel Press, a), Student Studybook (Dörtel Press, b) and Teacher Guidebook (Dörtel Press, c) interpret and evaluate them with a critical perspective. In the study, scanning model, which is one of the descriptive research patterns, was used. In the books examined at the end of the study, it was determined that the activities shaped around the phrases (noun clauses, adjective clauses, verb and verb groups, etc.); idioms, proverbs and phrases that can be evaluated in a phrase or sentence structure; meaning in sentence [(positive, negative, question, assumption, probability, comparison, suggestion, subjective and objective judgment; object-result, cause-effect sentences], and emotion (reproach, longing, sadness, regret, exaggeration, surprise, liking), the main and auxiliary elements of the sentence field; the main and auxiliary elements of the sentence such as sentence types according to meaning (positive, negative, question), place of predicate (canonical, transpose), type (noun and verb sentence) and structure (single predicate, multi predicate, verbial, conjunction); purpose according to its subject (active, passive) and object (transitive, intransitive), voice of verbs, sentence emphasis, sentence length, number of verbs in the sentence, expression disorders, etc. spread over a wide range in terms of the sentence information. At the end of the study, it was proposed to update and enrich the sentence information activities in 8th grade Turkish textbooks in the light of academic studies focused on grammar teaching processes, especially with the discovery learning in constructive approach carried out in the seafoodplus.infods: Sentence Knowledge Activities; 8th Grade Turkish Lessons, Student Study and Teacher Guide Book; Grammar Teaching with The Discovery Learning Method in Constructive Approach.

На правах рукописи

Артюшкова Екатерина Вячеславовна

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ЭНДОТЕЛИОПРОТЕКТИВНЫХ И КАРДИОПРОТЕКТИВНЫХ ЭФФЕКТОВ МЕЛЬДОНИЯ И ТРИМЕТАЗИДИНА ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ ДЕФИЦИТА ОКСИДА АЗОТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

- фармакология, клиническая фармакология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации.

Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор Покровский Михаил Владимирович

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Филиппенко Николай Григорьевич доктор медицинских наук, профессор Утешев Даниил Борисович

Ведущая организация:

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов» (РУДН).

Защита состоится «/г » ¿Ъбг/;'£¿¿¿9 г. в часов

на заседании диссертационного совегаД при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (, г. Курск, ул. К. Маркса, 3).

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России.

Автореферат разослан « а » ¡¿.¿¿¿^у-^Л^- г.

Ученый секретарь диссертационного совета

Пашин Е.Н.

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность исследования. Результаты экспериментальных и клинических исследований последних лет подтвердили концепцию о важной причинно-следственной взаимосвязи между эндотелиальной дисфункцией и прогрессированием и/или развитием артериальной гипертонии, атеросклероза, хронической сердечной недостаточности, сахарного диабета, метаболического синдрома, хронической почечной недостаточности и их осложнений (Кузьминова Н.В., ; Коваленко В.Н., Гулая Н.М., Семикопная Т.В., ; Невзорова В.А., ; Ющук E.H., Васюк Ю.А., Хадзегова А.Б. и др., ).

Коррекция эндотелиальной дисфункции при сердечно-сосудистой патологии сегодня является одним из наиболее перспективных направлений, определяющих вероятность развития сосудистых осложнений и способствующих улучшению прогноза в целом (Шишкин А.Н., Лындина М.Л., ; Шишкин А.Н., ; Небиеридзе Д.В., ; Higashi Y., Noma К., Yoshizumi М. et al., ; Vanhoutte P.M., ).

Эндотелиальная дисфункция - достаточно многогранный процесс, основными проявлениями которого являются снижение синтеза вазодилатирующих субстанций, увеличение продукции и/или повышение чувствительности эндотелиальных клеток артериального русла к действию вазоконстрикторных субстанций, а также развитие резистентности к эндотелийзависимым вазодилататорам, в первую очередь к оксиду азота (Титов В.Н., ; Хлебодаров Ф.Е., Михин В.П., Забелина И.В., ; Небиеридзе Д.В., Шилова Е.В., Толпыгина С.Н., ).

В настоящее время опубликованы работы, свидетельствующие об эффективности цитопротекторов при лечении артериальной гипертонии. Интерес к такого рода исследованиям и перспективность применения цитопротекторов у таких больных обусловлены многочисленностью органов-мишеней при артериальной гипертонии (миокард, эндотелий сосудистого русла), ведущую роль в поражении которых играет нарушение энергетического внутриклеточного обмена и активация свободнорадикальных процессов, приводящие к развитию эндотелиальной дисфункции, ремоделированию левого желудочка с формированием систоло-диастолической дисфункции сердца и развитию сердечной недостаточности (Михин В.П., Дюмина Н.В., Колтунова Т.Ю. и др., ; Приходько В.Ю., ; Хлебодаров Ф.Е., Михин В.П., Горлова A.B., ). Учитывая, что цитопротекторы способны позитивно воздействовать на развитие указанных ключевых патологических механизмов, применение цитопротекторов при сердечно-сосудистых заболеваниях действительно представляется актуальным.

В этой связи для коррекции дисфункции сосудистого эндотелия и торможения процессов свободнорадикального окисления цитопротекторы метаболического действия могут служить препаратами выбора, так как, наряду с активацией митохондриапьного аэробного окисления глюкозы, они способны уменьшать негативное воздействие оксидативного стресса на эндотелий сосудистой стенки и индуцировать образование оксида азота (Михин В.П., Хлебодаров Ф.Е., ; Sjakste N. et al., ; BeJardinelli R. et ai., ).

Таким образом, результаты оценки эффективности использования цитопротекторов метаболического действия для фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции при моделировании дефицита N0 позволят раскрыть перспективу целенаправленного и патогенетически осмысленного изучения возможности их применения в качестве эндотелиотропных аддитивов к существующим методам лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

Цель исследования: провести комплексное сравнительное изучение эндотелио- и кардиопротективного действия мельдония и триметазидина при Ь-ЫАМЕ-индуцированном дефиците оксида азота в эксперименте.

Задачи исследования.

1. Провести количественную оценку развития эндотелиальной дисфункции при Ь-ЫАМЕ-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

2. Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность мельдония при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

3. Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность триметазидина при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

4. Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность комбинированного применения мельдония с донатором оксида азота Ь-аргинином при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

5. Изучить эндотелио- и кардиопротективную активность комбинированного применения триметазидина с донатором оксида азота Ь-аргинином при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте с использованием функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

6. Провести интегральный векторный анализ для комплексной оценки функциональных характеристик сосудистой реактивности нитроксидергической системы, показателей сократимости и морфометрии миокарда с последующим расчетом вероятностного процента эндотелиопротекции на модели Ь-ИАМЕ-индуцированного дефицита N0.

Научная новизна. В работе решена актуальная задача фармакологии по доклинической оценке эндотелиотропной активности цитопротекторов метаболического действия с использованием коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), проведения функциональных проб, определения биохимических маркеров и результатов морфологических исследований.

В качестве потенциального эндотелиопротектора экспериментально обосновано использование цитопротектора метаболического действия мельдония, который в дозе 80 мг/кг способствует преобладанию эндотелийзависимого расслабления сосудов, снижению КЭД до значения

1,3±0,1 усл. ед. по сравнению с группой животных, не получавших лечения, где данный показатель был на уровне 4,9±0,6 усл. ед, а также полному предупреждению снижения концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота (NOx). Морфологические исследования обнаружили предотвращение развития мембранозной гломерулопатии, гипертрофии кардиомиоцитов и их некроз, а также деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

В ходе проведенного исследования на модели L-NAME-индуцированного дефицита NO выявлена эндотелиопротективная активность цитопротектора метаболического действия - триметазидина, который в дозе б мг/кг снижал коэффициент эндотелиальной дисфункции до значений 4,2±0,6 усл. ед., но при этом не увеличивал NO-продуцирующую функцию эндотелия. Морфологические исследования выявили благоприятное влияние на капилляры клубочков почек, а также отсутствие некротических изменений в миокарде.

Впервые установлено выраженное эндотелиопротективное действие комбинированного применения мельдония 80 мг/кг и триметазидина б мг/кг с природным донатором оксида азота - L-аргинином мг/кг. Комбинация мельдония и L-аргинина приводила к уменьшению КЭД до уровня интактных животных, не менее важным результатом явилось снижение данного показателя при использовании комбинации триметазидина с L-аргинином по сравнению с монотерапией триметазидином. Биохимические исследования выявили предотвращение снижения концентрации N Ох в обеих группах комбинаций цитопротекторов с L-аргинином. Подтверждением функционально-биохимических показателей, отражающих развитие L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции, явились результаты морфологического анализа: предотвращение развития мембранозной гломерулопатии, гипертрофии кардиомиоцитов и их некроза, а также деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

Практическая значимость. В работе обоснована эффективность фармакологической коррекции эндотелиальной дисфункции цитопротекторами метаболического действия при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота в эксперименте. Показано, что их использование позволяет нормализовать изменение соотношения сосудистых реакций на ацетилхолин (эндотелийзависимая вазодилатация) и нитропруссид (эндотелийнезависимая вазодилатация), что выражалось в преобладании эндотелийзависимого расслабления сосудов и снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции.

Одновременно результаты нагрузочных проб, биохимических и морфологических исследований свидетельствовали о положительной динамике морфофункциональных показателей сердечно-сосудистой системы (снижение адренореактивности, предотвращение исчерпания миокардиапьного резерва, нормализация структуры гломерулярных капилляров, отсутствие деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок, отсутствие гипертрофических изменений кардиомиоцитов) и о восстановлении активности NO-продуцирующей функции эндотелия (повышение концентрации NOx).

Полученные данные позволяют рекомендовать целенаправленные доклинические и клинические испытания исследуемых препаратов и их комбинаций с Ь-аргинином в качестве эндотелиотропных аддитивов при лечении патологических состояний, связанных с развитием эндотелиальной дисфункции.

Внедрение результатов научных исследований. Материалы диссертационного исследования, касающиеся эндотелиопротективной активности препарата мельдоний производства ОАО «Фармстандарт-Лексредства» (ЛСР/09), включены в состав документов, поданных на регистрацию в МЗ РФ.

Материалы диссертационного исследования, касающиеся эндотелиопротективной активности биологически активной добавки Ь-аргинин (свидетельство о государственной регистрации № У от ), включены в состав документов, поданных на регистрацию в ГУ НИИ питания РАМН. Результаты работы используются в работе кардиологического отделения МУЗ «Городская больница скорой медицинской помощи»; кардиологического отделения МУЗ «Городская больница № 1» г. Курска и в лекционных курсах кафедр фармакологии, клинической фармакологии ГОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России, кафедры фармакологии, клинической фармакологии и фармации ГОУ ВПО ОГУ, кафедры фармакологии и фармацевтических дисциплин ИПМО ГОУ ВПО БелГУ.

Положения, выносимые на защиту.

1. Мельдоний проявляет более выраженное эндотелиопротективное и кардиопротективное действие по сравнению с триметазидином на модели Ь-МАМЕ-индуцированного дефицита N0.

2. Комбинированное применение мельдония с Ь-аргинином и триметазидина с Ь-аргинином оказывает сопоставимое эндотелиопротективное и кардиопротективное действие на модели Ь-К'АМЕ-индуцированного дефицита N0.

3. Интегральный анализ совокупности гемодинамических, биохимических и морфологических показателей представляет эффективность фармакологического действия мельдония и триметазидина, а также их комбинаций с Ь-аргинином на фоне моделирования Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0 в следующей последовательности: мельдоний + Ь-аргинин > мельдоний > Ь-аргинин > триметазидин + Ь-аргинин > триметазидин.

Связь с планом НИР. Диссертация выполнена в соответствии с планом НИР ГОУ ВПО КГМУ Минздравсоцразвития России. Номер государственной регистрации темы -

Апробация работы. Материалы работы доложены на итоговых научных сессиях и конференциях молодых ученых КГМУ в , , , гг., й Всероссийской научной конференции студентов и молодых ученых с международным участием «Молодежная наука и современность», Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Высокотехнологичные методы диагностики и лечения заболеваний сердца, крови и эндокринных органов», XVII Национальном конгрессе «Человек и лекарство», V Национальном конгрессе терапевтов.

Апробация диссертации проведена на межкафедральной научной конференции кафедр фармакологии; клинической фармакологии; внутренних болезней № 2; инфекционных болезней и эпидемиологии; биоорганической химии, фармакогнозии и ботаники; анатомии человека; общей химии; фармацевтической, токсикологической и аналитической химии; управления и экономики фармации; фармации ФПО; травматологии, ортопедии и военно-полевой хирургии; мобилизационной подготовки здравоохранения и медицины катастроф; НИИ экологической медицины КГМУ (Курск, ).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 15 печатных работ, 5 из них - в изданиях, рекомендуемых ВАК РФ.

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов экспериментальных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и списка используемой литературы, включающего источников, из них 97 отечественных и зарубежных авторов. Диссертация изложена на страницах машинописи, содержит таблиц - 22, рисунков - 93, формул - 5.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Опыты проводили на белых крысах-самцах линии Wistar массой г. N-HiiTpo-L-apniHHH метиловый эфир (L-NAME) вводили ежедневно один раз в сутки внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг. Через 7 дней от начала эксперимента под наркозом (хлорал гидрат мг/кг) вводили катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей; болюсное введение фармакологических агентов осуществляли в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряли непрерывно посредством датчика и компьютерной программы "Biopac Systems, Inc.". Эндотелийзависимая (ЭЗР) и эндотелийнезависимая (ЭНЗР) сосудистые реакции оценивались посредством проведения функциональных проб с внутривенным введением ацетилхолина (АХ) мкг/кг (Laursen J.B., ) и нитропруссида натрия (НП) - 30 мкг/кг (Гала-ганМ.Е., ).

Исследование сократимости миокарда после моделирования патологии проводили у наркотизированных крыс, находящихся на управляемом дыхании. Полость левого желудочка зондировали иглой через верхушку сердца и посредством датчика RXA "Biopac Systems, Inc." и компьютерной программы "Biopac Systems, Inc.", США, регистрировали показатели кардиогемодинамики (левожелудочковое давление (ЛЖД), максимальную скорость сокращения (+dp/dtmax), максимальную скорость расслабления (-dp/dtmax), частоту сердечных сокращений (ЧСС) и интенсивность функционирования структур (ИФС) (произведение частоты сердечных сокращений и давления, развиваемого левым желудочком (мм рт. ст. х уд. мин) (Пашин Е.Н., ).

Для оценки функциональных возможностей миокарда у животных проводили нагрузочные пробы в представленной последовательности:

1. Проба на адренореактивность (внутривенное одномоментное введение раствора адреналина гидрохлорида Г1(Г5моль/л, из расчёта 0,1 мл на г) (Гладченко М.П., Покровский М.П., Артюшкова Е.Б. и др., ; Гурбанов К.К., Ковалев Г.В., Паперно A.A., ).

2. Нагрузка сопротивлением (пережатие восходящей аорты на 30 сек (Гладченко М.П., Покровский М.П., Артюшкова Е.Б. и др., ).

3. 3-минутная гипоксия [61, 64, 65] (Пашин E.H., ; Петрищев H.H., Власов Т.Д., ; Пичугин В.В., ).

Биохимические маркеры эндотелиальной дисфункции. Нами использована модификация метода определения стабильных метаболитов NO, позволяющая после депротеинизации сыворотки крови проводить одноэтапное количественное определение суммарных нитратов и нитритов (Метельс-кая В.А., ). Уровень метаболитов оксида азота (то есть суммарную концентрацию нитратов и нитритов, NOx) определяли колориметрическим методом по развитию окраски в реакции диазотирования нитритом сульфаниламида, входящим в состав реактива Грисса.

Уровень экспрессии эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS) определяли в клеточном лизате по методу R.J. Hendrickson (Метельская В.А., Туманова Н.Г., Литинская O.A. и др., ). Уровень экспрессии eNOS в аорте крыс измеряли с помощью поликлональных мышиных антител против eNOS (BD Transduction Labs) с последующим проявлением методом усиленной хемилюминесценции ECL. В качестве контроля использовали стандартно приготовленные образцы из 1 млн. культивируемых эндотелиальных клеток бычьей аорты (ВАЕС), интенсивность полос которых принимали за %.

Для морфологического подтверждения развития моделируемых патологических процессов кусочки органов фиксировали в 10% нейтральном формалине и заливали в парафин по общепринятым методикам (Меркулов Г.А., ). Парафиновые срезы толщиной мкм окрашивали гематоксилином и эозином. В почках обращали внимание на состояние капилляров клубочков, толщину стенок артерий и артериол и их эндотелия. В сердце изучали общее состояние эндокарда и перикарда, кардиомиоцитов и стромы, оценивали состояние сосудов миокарда и их эндотелия. Кроме этого, в миокарде левого желудочка с помощью окуляр-микрометра измеряли толщину кардиомиоцитов.

Обоснование доз исследуемых препаратов. При моделировании L-NAME-индуцированного дефицита NO исследуемые вещества вводились в соответствующих дозах один раз в сутки в течение 7 дней через 30 минут после введения L-NAME. Принятая схема соответствует основной массе экспериментальных исследований, выполненных на крысах на данной модели патологии (Lopez R. et а!., ; Kataoka С. et al., ; Pechänovä О. et al„ ).

При выборе доз цитопротекторов метаболического действия мельдония и триметазидина исходили из максимальной терапевтической дозы препаратов с последующим межвидовым переносом доз с использованием коэффициента

пересчета доз для животных, в частности крыс (РгепеюЬ й а1., ; Уланова И.П. и др, ).

Максимальная суточная доза мельдония (Кардионат®, производства ОАО «Фармстандарт-Лексредства», Россия) для человека массой 70 кг равна мг, в результате переноса доз с человека на крысу получили дозу 80 мг/кг, которую применяли при внутрижелудочном введении экспериментальным животным для оценки эндотелио- и кардиопротективной активности препарата.

При изучении эндотелио- и кардиопротективной активности триметазидина (Предуктал® МВ, производства «Фармацевтическое предприятие АНФАРМ А.О.», Польша), животные на фоне Ь-ЫАМЕ-индуцировэнного дефицита оксида азота внутрижелудочно получали препарат в дозе 6 мг/кг. Доза триметазидина рассчитывалась исходя из максимальной суточной дозы препарата для человека массой 70 кг, которая равна 70 мг.

Согласно данным литературы, кардиотропные эффекты донатора оксида азота Ь-аргинина в экспериментах на крысах обнаруживаются в диапазоне доз от 10 до мг/кг (Созыкин А.В. и др., ; Ока К. е1 а1., ; РаИоэЫ А. й а!., ). Эндотелиопротективная активность Ь-аргинина производства "А^поток) Со. 1МС" (Япония) исследовалась нами в дозе мг/кг внугрибрюшинно в течение 7 дней через 30 минут после введения Ь-ЫАМЕ, что соответствует основной массе исследований на крысах (Эеп§ Ь.У. е1 а1., ).

Комбинированное использование метаболических цитопротекторов мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг проводилось по вышеописанному протоколу один раз в сутки в течение 7 дней на фоне введения Ь-ЫАМЕ.

Статистическая обработка результатов исследования. Достоверность наблюдавшихся при действии исследованных препаратов изменений параметров, как абсолютных, так и в процентах от исходного уровня, определяли путем расчета средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (±т) и достоверности различий сравниваемых параметров между группами с использованием Мез! для групп с разными дисперсиями, достоверными считались различия сравниваемых параметров при р<0,

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

1. Исследование эндотелиоиротективных и кардиопротективных эффектов мельдония, триметазидина и Ь-аргинина при моделировании Ь-хХАМЕ-индуцировапного дефицита оксида азота.

Динамика функциональных, биохимических и морфологических показателей при моделировании Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0.

Длительное, в течение 7 суток, однократное внутрибрюшинное введение Ь^АМЕ в дозе 25 мг/кг привело к стойкому повышению АД (рис. 1 Ад).

Проведение функциональных проб с оценкой реакции на эндотелийзависимое и эндотелийнезависимое расслабление показало существенные отличия в группе с Ь-ИАМЕ-индуцированной патологией в сравнении с интактными животными. Реакция на введение ацетилхолина характеризуется резким падением АД и брадикардией (рис. 2). Треугольник над

кривой восстановления артериального давления принимался нами как площадь эндотелиальной реакции. При этом очевидно, что площадь эндотелийзависимой реакции при моделировании патологии в несколько раз меньше, чем у интактных животных.

Аналогично оценивали эндотелийнезависимую реакцию на нитропруссид. Обращает на себя внимание отсутствие принципиальной разницы в площадях эндотелийнезависимых реакций у интактной и контрольной групп, несмотря на более высокие цифры АД (рис. 3).

□ 1 - Интактные И 2 - Ь-ЫАМЕ

1

Рис. 1. Функциональные, биохимические и морфологические показатели при моделировании Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота. Примечание. Здесь и везде далее: АД - артериальное давление, КЭД -коэффициент эндотелиальной дисфункции, АДр - адренореактивность, НС -нагрузка сопротивлением, еЫОБ - экспрессия ЫО-синтазы, ЫОх -концентрация конечных стабильных метаболитов оксида азота, ДКМЦ -диаметр кардиомиоцитов, ТСС - толщина сосудистой стенки.

х - при р<0,05 в сравнении с группой интактных животных

ДКМЦ и ТСС

30,0

"Л

т*

ИШ1И1Ш

а) интактные животные

б) животные с патологией

Рис. 2. Кривые САД, ДАД, ЧСС при проведении функциональной пробы на эндотелийзависимую вазодилатацию (внутривенное введение ацетилхолина 40 мкг/кг).

тнгвплтгэттзгтппш

а) интактные животные

б) животные с патологией

Рис. 3. Кривые САД, ДАД, ЧСС при проведении функциональной пробы на эндотелийзависимую вазодилатацию (внутривенное введение нитропруссида натрия 30 мкг\кг).

Математическое выражение описанного явления представлено нами в виде коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), являющегося отношением площади среднего артериального давления на нитропруссид к площади среднего артериального давления на ацетилхолин.

В наших экспериментах КЭД в группе интактных животных составил 1,1±0,1 усл. ед., при Ь-МАМЕ-индуцированном дефиците оксида азота - почти в 5 раз больше, его значение составило 4,9±0,6 усл. ед. (рис. 1Кэд)-

Развитие патологии привело к увеличению абсолютных значений ЛЖД при проведении пробы на адренореактивность и снижению показателей сократимости миокарда в пробе с нагрузкой сопротивлением (рис. 1АДр, Нс)- У интактных животных ЛЖД к й секунде снижалось до 83,6±4,6%, а у животных с Ь-МАМЕ-индуцированной патологией до значения - 66,0±2,5%.

Характерная динамика биохимических маркеров Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота представлена на рисунке 1еж«,мох- Так, концентрация нитрит-ионов (К'Ох) у животных, получивших Ь-ЫАМЕ, составила 61,2±3,6 мкМоль, тогда как у интактных животных этот показатель был на уровне ,1 ±4,1 мкМоль. Экспрессия эндотелиальной МО-синтазы

(еЫОБ) в группе интактных животных и животных с патологией составила соответственно 72,9±3,8% и 21,4±4,7%.

Подтверждением функционально-биохимических показателей,

отражающих развитие Ь-ЫАМЕ-индуцированной эндотелиальной дисфункции, явились результаты морфологических исследований (рис. ). На фоне введения Ь-МАМЕ происходило утолщение базальных мембран капилляров клубочков, что придает им характерный вид «проволочных петель». При этом клубочки нередко приобретают фрагментированный, «лапчатый» вид, что свидетельствует о развившейся мембранозной гломерулопатии (рис. 5).

Другим признаком повышенного артериального давления является гипертрофия стенок внутриорганных артерий почек и сердца, толщина которых достигала 27,5±2,3 мкм (по сравнению с толщиной стенок сосудов интактных животных 10,0±0,8 мкм). Нередко при этом эндотелий гипертрофированных сосудов претерпевал морфологические изменения, свидетельствующие о развитии эндотелиальной дисфункции: отек эндотелия и его пикноз (рис. б, рис. 7). В ходе выполнения эксперимента в сердцах животных контрольной группы были обнаружены гипертрофия кардиомиоцитов левого желудочка и увеличение размеров ядер по сравнению с интактными животными (рис. 1дкмц)- '

1ЙЩЩЩ тяяГм W3 ч

Рис. 4. Почка интактной крысы. Клубочек с полнокровными капиллярами, полнокровный сосуд среди извитых канальцев. Окраска гематоксилином и эозином (Г+Э). х Рис. 5. Крыса с экспериментальной артериальной гипертензией: клубочки имеют «лапчатые» очертания: базальные мембраны капилляров утолщены («проволочные петли»). Окраска Г+Э. х

Ущщ^Т Щ Щ Ktli '

Рис. 6. Миокард интактной крысы. Среди кардиомиоцитов мелкая полнокровная артерия с неповрежденным эндотелием. Гипертрофия стенок отсутствует. Окраска Г+Э. х Рис. 7. Крыса с экспериментальной артериальной гипертензией: стенка интрамуральной артерии миокарда гипертрофирована, эндотелий местами отечный. Окраска Г+Э. х

Также нами выявлены субэндокардиальные некротические изменения кардиомиоцитов (у четырех крыс из 10) и очаги формирующегося склероза на месте погибших кардиомиоцитов.

Таким образом, введение Ь-ЫАМЕ 25 мг/кг внутрибрюшинно вызывает развитие эндотелиальной дисфункции, характеризующейся резким увеличением КЭД, АД, повышением адренореактивности, исчерпанием миокардиального резерва, характерными биохимическими сдвигами и морфологической картиной.

Динамит функциональных, биохимических и морфологических показателей при монотерапии мельдонием, триметазидином и Ь-аргинином на фоне моделирования Ь-А'АМЕ-индуцированного дефицита NО.

Проведенные нами исследования показали, что среди цитопротекторов метаболического действия мельдоний 80 мг/кг по сравнению с триметазидином 6 мг/кг обладает наиболее выраженным эндотелиопротективным эффектом, сопоставимым с таковым у Ь-аргинина мг/кг и выражающимся в преобладании эндотелийзависимого расслабления сосудов и снижением КЭД. Так, КЭД в группах животных, получавших мельдоний, составил 1,3±0,1 усл. ед., триметазидин - 4,2±0,6 усл. ед, Ь-аргинин -2,5±0,1 усл. ед. (рис. 8Кэд)-

Обнаружено, что мельдоний 80 мг/кг и триметазидин 6 мг/кг не предотвращали развития выраженной гипертензии и значения САД и ДАД были достоверно выше соответствующих значений интактных животных во всех сериях экспериментов. Максимальное снижение САД и ДАД наблюдалось лишь в группе с введением Ь-аргинина мг/кг, однако целевой уровень АД при этом достигнут не был (рис. 8ад).

Для оценки функциональных возможностей миокарда у животных с Ь-ЫАМЕ-индуцированным дефицитом оксида азота проводились нагрузочные пробы. Проба на адренореактивность на фоне терапии мельдонием 80 мг/кг и Ь-аргинином мг/кг показала снижение максимальных цифр ЛЖД до значений ,4±6,7 мм seafoodplus.info и ,6±11,2 мм seafoodplus.info соответственно. В то время как триметазидин 6 мг/кг не предотвращал повышения адренореактивности, вызванного Ь^АМЕ-индуцированной патологией (рис. 8Адр).

Дальнейшее сравнительное исследование кардиопротективных эффектов цитопротекторов метаболического действия при проведении пробы на нагрузку сопротивлением выявило способность всех препаратов предотвращать исчерпание миокардиального резерва. Сократимость левого желудочка на й секунде проведения пробы у интактных животных составила 83,6±4,6% от величины 5-й секунды, принятой за %, у животных с Ь-ЫАМЕ патологией -б6,0±2,5%, в группах, получавших лечение мельдонием 80 мг/кг, триметазидином 6 мг/кг и Ь-аргинином мг/кг, данный показатель был на уровне 79,6±3,4%, 94,0±4,2% и 84,3±3,4% соответственно (рис. 8НС)-

МО-продуцирующая функция эндотелия исследована нами на основании определения в сыворотке крови концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота (ЫОх). Концентрация Т\'Ох на фоне лечения мельдонием 80 мг/кг и Ь-аргинином мг/кг, в отличие от триметазидина 6 мг/кг, увеличивалась и достоверно не отличалась от уровня конечных стабильных метаболитов оксида азота интактных животных (рис. 8К0*).

Ч> I! нгнктные -в- ЬЛАМЕ А [\лм К - мельдон X Ь-.\АМ Е + триметащдии —в—Ь-МАМЕ+ Ь-аргиннн

84,3%" 83,6%

79,6%'

ДКМЦи гсс

адкмц в тсс

О I - Интзктные

НЗ - !МАГ'ЛЕ-1 мельдоний 80 мг/кг 83 5 - Ь-ЫАМЕ+ Ь-аргинин иг/кг

И 2 - !,-ХЛМ!-:

К 4 - Ь-ЫАМЕ + триметазидин 6 мг/кг

Рис. 8. Влияние мельдония 80 мг/кг, триметазидина 6 мг/кг и Ь-аргинина мг/кг на функциональные, биохимические и морфологические показатели при моделировании Ь-КАМЕ-индуцированного дефицита N0. Примечание. х - при р<0,05 в сравнении с группой интактных животных, у- при р<0,05 в сравнении с группой животных, получавших Ь-ЫАМЕ.

Данные морфологических исследований показали, что введение мельдония 80 мг/кг, триметазидина б мг/кг и Ь-аргинина мг/кг положительно повлияло на морфологические изменения почек и сердца крыс с экспериментальной артериальной гипертензией (рис. 8дкмц)' Так, после введения животным мельдония отмечается нормализация структуры гломерулярных капилляров, предотвращение развития гипертрофических изменений миокарда, отсутствуют деструктивные изменения эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок, толщина которых снижалась до 11,0±1,0 мкм.

На фоне введения триметазидина в почках почти полностью исчезли признаки мембранозной гломерулопатии и капилляры клубочков выглядели в большинстве случаев так же, как и у интактных крыс. Однако стенки мелких артерий, как правило, оказывались гипертрофированными (толщина стенок

21,5±1,9 мкм), а их эндотелий нередко был пикнотизирован и частично слущивался. Диаметр кардиомиоцитов левого желудочка был близок к таковому у крыс с артериальной гипертензией, что свидетельствует о сохранении гипертрофических изменений миокарда. В то же время важно отметить, что некротические изменения миокарда были выявлены лишь у одной крысы из 10, при этом они выражались в наличии единичных и очень небольших очажков репарируемого некроза.

При морфологическом исследовании почек и сердца обнаружен выраженный протекгивный эффект Ь-аргинина. Отмечается нормализация структуры гломерулярных капилляров в отсутствие деструктивных изменений эндотелия внутриорганных артерий почек и сердца, а также признаков гипертрофии их стенок, толщина которых составляла 11,0±0,9 мкм по сравнению с нелеченой группой животных. Препарат также препятствовал развитию гипертрофических изменений кардиомиоцитов.

Таким образом, анализ совокупности функциональных, биохимических, морфологических показателей свидетельствует о разной степени выраженности эндотелиопротективных и кардиопротективных эффектов мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг при Ь^АМЕ-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте.

3. Исследование эндотелиопротективных и кардиопротективных эффектов комбинированного применения мельдония и триметазидина с Ь-аргинином при моделировании Ь^АМЕ-индуцированного дефицита оксида азота.

Комбинированное применение мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг продемонстрировало наличие выраженного эндотелиопротективного эффекта для двух исследованных композиций, что подтверждалось достоверным снижением КЭД до значений 1,4±0,1 усл. ед. и 2,5±0,2 усл. ед. соответственно, по сравнению с группой нелеченых животных 4,9±0,6 усл. ед. (рис. 9КЭД).

На фоне введения Ь-МАМЕ комбинированное применение мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг, в отличие от монотерапии, приводило к снижению АД, при этом наибольший гипотензивный эффект достигался при введении комбинации мельдония с Ь-аргинином, однако целевой уровень АД при этом достигнут не был (рис. 9Лд).

Проба на адренореактивность не выявила снижения значений максимального левожелудочкового давления у животных, получавших комбинированное лечение мельдонием 80 мг/кг и триметазидином б мг/кг с Ь-аргинином, несмотря на достоверное снижение данного показателя при монотерапии донатором оксида азота - Ь-аргинином (рис. 9ддр).

Нагрузка сопротивлением показала, что все исследуемые комбинации обладают кардиопротективным действием, выражающимся в способности повышать сократимость миокарда до уровня, сопоставимого с группой интактных животных: мельдоний 80 мг/кг+Ь-аргинин мг/кг 75,4±3,8%, триметазидин б мг/кг+Ь-аргинин мг/кг 84,2±6,4%, интактные животные 83,6±4,б%, Ь-ЫАМЕ 66,0±2,5% (рис. 9НС).

Рис, 9. Влияние комбинаций мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг на функциональные, биохимические и морфологические показатели при моделировании Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0. Примечание. * - при р<0,05 в сравнении с группой интактных животных, у- при р<0,05 в сравнении с группой животных, получавших Ь-ЫАМЕ.

Аналогичная тенденция получена при оценке МО-продуцирующей функции эндотелия. Концентрация 1\Юх при комбинированным лечении была также значительно выше, чем в группе животных, не получавших лечения. При этом суммарная концентрация нитрат- и нитрит-ионов (ТЧОх) на фоне применения комбинации мельдония 80 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг равнялась ,5±9,1 мкМоль, триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг - ,9± 11,2 мкМоль, Ь-ЫАМЕ - 61,2±3,6 мкМоль (рис. 9Шх).

□ дкмц в тсс

П ] - Интактные ® 2 - Ь-ЫАМЕ Н 3 - Ь-ЫАМЕ+мельдоний 80 мг/кг И 4 ■ ЫММЕ+триметазидин 6 мг/кг Н 5 - Ь-ЫАМЕ+Ь-аргинин мг/кг В 6 - Е-ЫАМЕ+мельдоний 80 мг/кгИ-аргинин мг/кг ОР 7 - Ь-ЫАМЕ+триметазидин 6 мг/кг+Ь-аргинин мг/кг_

,0

ь

¿,0 2 ,0 50,0 0,0

,0% 90,0% 80,0%, 70,0%,

♦ Инткктные -Я- Ь-ХАМЕ —Л— ЫУАМЕ+мельдоний -Х- Ь-1МАМЕ+трнметазидин —О— А М Е+Ь-ярги ни н —I— АМЕ+мельдоний + Ь-яргинин -Х- Ь-№АМЕ+триметязидин+Ь-аргинин

ДКМЦ и ТСС

27,5 —

21,5х

«г

и 5

11,0У 10,0* 13,оу

Морфологическое исследование почек и сердца на фоне введения комбинации мельдония 80 мг/кг и Ь-аргинина мг/кг выявило отсутствие признаков мембранозной гломерулопатии и дегенеративных изменений эндотелия внутриорганных артерий. При морфометрии также не обнаруживались гипертрофические изменения стенок артерий, толщина их была на уровне 10,0±1,0 мкм. В сердце наблюдаюсь уменьшение диаметра кардиомиоцитов (рис. 9ДКМц)-

На фоне введения комбинации триметазидина б мг/кг и !,■-аргинина мг/кг обнаружен протективный эффект, аналогичный описанному в группе с Ь-аргинином. Это выражалось в предотвращении развития мембранозной гломерулопатии, уменьшении гипертрофических изменений стенок сосудов почек и сердца до 13,0±1,2 мкм, а также уменьшении диаметра кардиомиоцитов (рис. 9дамц)-

Таким образом, анализ совокупности функциональных, биохимических, морфологических показателей свидетельствует о выраженных эндотелиопротективных и кардиопротективных эффектах комбинаций мельдония 80 мг/кг и триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг при Ь^АМЕ-индуцированной модели дефицита оксида азота в эксперименте.

4. Интегральный векторный анализ гемодинамических, биохимических и морфологических показателей в комплексной оценке эндотелиопротективных и кардиопротективных эффектов мельдония и триметазидина и их комбинаций с Ь-аргинином.

Для оценки эндотелио- и кардиопротективного действия исследуемых препаратов нами был использован комплекс функциональных проб, биохимических маркеров и результатов морфологических исследований, позволяющий дать интегральную характеристику эндотелиальной и миокардиальной функции сердечно-сосудистой системы. С этой целью значения САД, ДАД, КЭД, диаметра кардиомиоцитов, ЫОх и значение исчерпания миокардиального резерва были представлены в процентном отношении от соответствующих значений группы интактных животных, принятых за %, с последующим расчетом площадей векторных диаграмм, которые выражались в условных единицах (усл. ед.) (рис. 10).

Сравнивая площади векторных диаграмм, мы получили выраженные различия между группой интактных животных и животных с эндотелиальной дисфункцией. Значение площади векторной диаграммы в группе с Ь-ЫАМЕ-индуцированньш дефицитом N0 оказалось увеличенным на 60% по сравнению с интактной группой, что соответствует симптомокомплексу выраженной АГ и эндотелиальной дисфункции (рис. 10).

Не менее важным результатом, полученным в ходе исследования, является сопоставимая площадь векторных диаграмм по совокупности эндотелио- и кардиопротективных эффектов комбинации мельдония с Ь-аргинином и монотерапии мельдонием, что выражалось в снижении площади векторной диаграммы соответственно на 33% и 31% и подтверждает их положительное равноценное фармакодинамическое действие на модели Ь-НАМЕ-индуцированного дефицита оксида азота (рис. 10).

Проанализировав площади векторных диаграмм, мы не получили выраженных различий между контрольной группой животных и группой, получавшей лечение триметазидином. Однако мы получили различия между группой животных с эндотелиальной дисфункцией и группой, получавшей комбинацию триметазидина и Ь-аргинина, при этом площадь векторной

диаграммы уменьшилась на 20% (рис. 10).

Дальнейший анализ векторных диаграмм привел к расчету дельты эндотелиопротекции (1) и ее вероятностного процента (2):

Аэя = Sl -NAME ^'препарата j

где (1)

ДЭп - дельта эндотелиальной дисфункции,

Sl-name- площадь фигуры при L-NAME гипертензии, Sпрепарата-- площадь фигуры при коррекции L-NAME исследуемым препаратом;

А эп

Рэп ~-х % , где РЭп - вероятностный пропент (2)

&L-NAME

ЛL-NAME ~~ SL-NAME ~ Sинтактчых

При проведении расчетов получили, что дельта L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота равна 3,31 (усл. ед.), данную величину принимали за % при последующих расчетах вероятностного процента эндотелиопротекции для каждого исследуемого препарата (рис. 11).

□ 1 - Интяктные □ 2 - L-NAME+триметязидин 6 иг/кг

П 3 - L-NAME+трнметазидин 6 иг/кг+Ь-аргннин мг/кг В 4 - L-NAME+L-яргинин мг/кг

И 5 - L-NAME+мельдоннй 80 мг/кг Н 6 - I.-N АМF^seafoodplus.info! 80 мг/кг+Ь-пргиннн мг/кг

Рис. Вероятностный процент эндотелиопротекции исследуемых препаратов при L-NAME-индуцированном дефиците NO.

Данный подход позволил упрощенно, но интегративно представить эффективность действия препаратов в соответствующих дозах при коррекции L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота и наглядно отобразить различия между исследуемыми препаратами, которые расположились в следующий ряд: мельдоний 80 мг/кг+Ь-аргинин мг/кг > мельдоний 80 мг/кг > L-аргинин мг/кг > триметазидин 6 мг/кг+Ь-аргинин мг/кг > триметазидин 6 мг/кг.

Таким образом, в результате наших исследований впервые проведена сравнительная оценка эндотелиопротективных и кардиопротективных эффектов цитопротекторов метаболического действия мельдония и триметазидина при моделировании дефицита оксида азота в эксперименте, что раскрывает перспективу целенаправленного изучения возможностей их использования как существенного дополнения при лечении патологических состояний сердечно-сосудистой системы, связанных с развитием эндотелиальной дисфункции.

выводы

1. Эндотелиальная дисфункция, вызванная введением М-нитро-Ь-аргинин метилового эфира (Ь-КАМЕ) в дозе 25 мг/кг/сут в течение 7 суток лабораторным животным, характеризуется развитием артериальной гипертензии (/ мм рт. ст.), увеличением КЭД в 4,5 раза по сравнению с группой интактных животных, повышением адренореактивности, снижением сократимости миокарда до 66,0±2,5%, уменьшением в 3,4 раза концентрации конечных стабильных метаболитов оксида азота МОх и снижением в 1,9 раза экспрессии еКОБ, а также развитием мембранозной гломерулопатии, гипертрофии миокарда и стенок внутриорганных артерий почек и сердца, отеком эндотелия и его пикнозом, некрозом кардиомиоцитов в 40% случаев.

2. Мельдоний 80 мг/кг проявляет выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индупированлого дефицита N0, что выражается в снижении КЭД до 1,3±0,1 усл. ед., полном предупреждении снижения концентрации >Юх, предотвращении развития гиперадренореактивности, а также в повышении сократимости миокарда до 79,6±3,4% при проведении пробы на нагрузку сопротивлением. Морфологические исследования обнаружили предотвращение развития мембранозной гломерулопатии, гипертрофии кардиомиоцитов и их некроза, деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

3. Триметазидин 6 мг/кг проявляет менее выраженное эндотелиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0 по сравнению с мельдонием 80 мг/кг, что выражается в снижении КЭД до 4,2±0,6 усл. ед. и отсутствии влияния на ЫО-продуцирующую функцию эндотелия. Одновременно обнаружено значительное кардиопротективное действие препарата, проявляющееся в повышении сократимости миокарда до 94,0±4,2% при проведении пробы на нагрузку сопротивлением. Морфологические исследования обнаружили снижение утолщения базальных мембран клубочков и отсутствие некротических изменений в миокарде.

4. Комбинированное применение мельдония 80 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг оказывает выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0, что выражается в снижении КЭД до 1,4±0,1 усл. ед., предотвращении снижения концентрации МОх, а также в повышении сократимости миокарда до 75,4±3,8% при проведении пробы на нагрузку сопротивлением. Морфологические исследования обнаружили предотвращение развития мембранозной гломерулопатии, гипертрофии кардиомиоцитов, деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

5. Комбинированное применение триметазидина 6 мг/кг с Ь-аргинином мг/кг оказывает выраженное эндотелио- и кардиопротективное действие на модели Ь-ЫАМЕ-индуцированного дефицита N0, что выражается в снижении КЭД до 2,5±0,2 усл. ед., предотвращении снижения концентрации МОх, а также в повышении сократимости миокарда до 84,2±6,4% при проведении пробы на нагрузку сопротивлением. Морфологические исследования обнаружили

предотвращение развития мембранозной гломерулопатип, гипертрофии кардиомиоцитов, деструктивных изменений эндотелия сосудов и признаков гипертрофии их стенок в почках и миокарде.

6. Интегральный анализ эффективности фармакологического действия мельдония и триметазидина показал, что наиболее выраженную эндотелио- и кардиопротективную активность оказывает мельдоний 80 мг/кг по сравнению с триметазидином 6 мг/кг. Комбинированное применение мельдония 80 мг/кг и триметазидина б мг/кг с L-аргинином мг/кг проявляет положительное фармакодинамическое взаимодействие, что позволяет расположить исследуемые препараты в следующей последовательности: мельдоний 80 мг/кг + L-аргинин мг/кг > мельдоний 80 мг/кг > L-аргинин мг/кг > триметазидин б мг/кг + L-аргинин мг/кг > триметазидин б мг/кг.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

1. Исследование эндотелио- и кардиопротективных эффектов препарата «Кардионат» при моделировании L-NAME-индуцнрованного дефицита оксида азота / М.В. Корокин, Е.В. Артюшкова, М.В. Покровский н др. // Курский науч.-практ. вестн. «Человек и его здоровье». - - № 3. -С.

2. Метаболическая и антиоксидантная терапия L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции / Е.Б. Артюшкова, М.В. Покровский, Е.В. Артюшкова и др. // Кубанский науч. мед. вестн. - - № ().-С.

3. Исследование кардиопротективных эффектов 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата дигидрата при моделировании дефицита оксида азота с помощью специфической блокады индуцибельнои NO-синтазы / Е.В. Артюшкова, М.В. Корокин, М.В. Покровский и др. II Аллергология и иммунология. - - Т. 9,№ С.

4. Исследование эндотелиопротективных эффектов 3-(2,2,2-триметилгидрази-ний) пропионата дигидрата при моделировании L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции / Е.Б. Артюшкова, М.В. Покровский, Е.В. Артюшкова и др. И Аллергология и иммунология. - - Т. 9, № 3. -С.

5. Артюшкова, Е.В. Увеличение уровня гамма-бутиробетаина - фармакологическая мишень для коррекции эндотелиальной дисфункции / Е.В. Артюшкова // Кубанский науч. мед. вестн. - - № 4 (). - С.

6. Исследование эндотелиопротективных эффектов препарата «Кардионат» (мнн милдронат) на ADMA-подобной модели дефицита оксида азота при специфической блокаде NO-синтазы / Е.В. Артюшкова, М.В. Покровский, М.В. Корокин и др. // Междунар. жури, по иммунореабилитации. - -Т. 11, № 1. - С.

7. Артюшкова, Е.В. Сравнительное исследование эндотелио- и кардиопротективных эффектов мельдония и триметазидина при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота в эксперименте / Е.В. Артюшкова // Кубанский науч. мед. вестн. - - № 1 (). - С.

8. Эндотелио- и кардиопротектнвные эффекты мельдония и триметазидина при L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции в эксперименте / Е.В. Артюшкова, М.В. Покровский, Е.Б. Артюшкова и др. // Курский науч.-практ. вести. «Человек и его здоровье». - - № 3. - С.

9. Эндотелиопротективные эффекты мельдония и триметазидина при экспериментальном дефиците оксида азота / Е.В. Артюшкова, М.В. Покровский, Е.Б. Артюшкова и др. // XVII Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство»: сб. материалов конгр.; тез. докл. (г. Москва, апр. ). - М., -С.

Кардиопротектнвные эффекты мельдония и триметазидина при экспериментальном дефиците оксида азота / Е.В. Артюшкова, М.В. Покровский, Е.Б. Артюшкова и др. // XVII Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство»: сб. материалов конгр.; тез. докл. (г. Москва, апр. ). -М., С.

Фармакологическая коррекция морфологических изменений в сердце и почках при L-NAME-индуцированном дефиците NO / B.C. Барсуков, В.Т. Дудка, Е.В. Артюшкова и др. // XVII Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство»: сб. материалов конгр.; тез. докл. (г. Москва, апр. ). -М, С.

Артюшкова, Е.В. Применение комбинаций метаболических цитопротекторов мельдония и триметазидина с L-аргинином с целью коррекции L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции / Е.В. Артюшкова, М.В. Корокин, О.С. Гудырев // Тез. Всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием «Высокотехнологичные методы диагностики и лечения заболеваний сердца, крови и эндокринных органов» (г. С.-Петербург, мая ).- СПб, - № 2. - С.

Артюшкова, Е.В. Исследование NO-продуцирующей функции эндотелия на фоне введения комбинаций мельдония и триметазидина с L-аргинином при L-NAME-индуцированном дефиците оксида азота / Е.В. Артюшкова, М.В. Корокин, О.С, Гудырев // Тез. Всерос. науч.-практ. конф. с междунар. участием «Высокотехнологичные методы диагностики и лечения заболеваний сердца, крови и эндокринных органов» (г. С.-Петербург, мая ). - СПб, - № 2. - С.

Эндотелиопротективные эффекты цитопротектора метаболического действия триметазидина и его комбинации с L-аргинином при экспериментальном моделировании дефицита оксида азота / Е.В. Артюшкова, М.В. Покровский, О.С. Гудырев и др. // Материалы V Нац. конгр. терапевтов ( ноября, г.). - М.: ООО «Изд. дом «Бионика», С.

Морфологическая оценка влияния цитопротекторов метаболического действия и их комбинаций с L-аргинином при экспериментальном моделировании эндотелиальной дисфункции / Е.В. Артюшкова, М.В. Покровский, М.В. Корокин и др. // Материалы V Нац. конгр. Терапевтов ( ноября, г.). - М.: ООО «Изд. дом «Бионика», - С.

Лицензия ЛР № от г. Сдано в набор г. Подписано в печать г. Формат 30xg. Бумага офсетная. Гарнитура Times New Rom. Печать офсетная. Усл. печ. л. 1,0. Тираж экз. Заказ № "А". Издательство Курского государственного медицинского университета , г. Курск, ул. К. Маркса, 3.

Kırgız Edebiyatı’nın kurucusu, büyük devlet adamı Kasım Tınıstanov 9 Eylül tarihinde dünyaya geldi. yıllarında değişik Özbek mekteplerine devam etti. yılları arasında Karakol şehrindeki Rus Tüzem Mektebi’nde okudu. Taşkent’te yayımlanan Cas Kayrat, Canga Öris, Sana, Ak Col adlı Kazak gazetelerinde çeşitli görevlerde çalıştı. Kasım Tınıstanov sosyal içerikli, pedagojik hikayeleriyle, şiirleriyle, eğitimciliğiyle, dilciliğiyle, gazeteciliğiyle, aydın kimliğiyle tanınmış bir insandır. Kasım Tınıstanov, Kırgız Türklerinin medeniyet tarihinde çok önemli bir yere sahiptir. Kırgız Türkçesinin önemli gramer âlimi, Kırgız Türkçesi Morfolojisi, Kırgız Türkçesi Sentaksı, Kırgız Türkçesi Grameri kitaplarının müellifidir. Kasım Tınıstanov, yirminci yüzyılda Manas destanını derleme çalışmalarını da Kırgızistan’da başlatan halk bilimcilerdendir. yılında Azerbaycan’ın başkenti Bakü’de gerçekleştirilen Türkoloji kongresine Kırgız Türkleri adına katılmış ve alfabe değişikliğiyle ilgili Bakü’de ilmî bir konuşma yapmıştır. Kırgız Türkolog Kasım Tınıstanov’un Bakü Türkoloji Kongresi’nde Latin alfabesine geçişle ilgili görüşleri ve Latin alfabesine geçişte bugünkü durum makalede incelenecektir.